biểu ngữ tiêu đề đơn

Các bước cụ thể của nuôi cấy tế bào

1. Thiết bị thông dụng

1. Trang thiết bị trong phòng chuẩn bị

Máy cất nước cất một lần, máy cất nước cất hai lần, bình chứa axit, lò nướng, nồi áp suất, tủ bảo quản (bảo quản đồ chưa tiệt trùng), tủ bảo quản (bảo quản đồ đã tiệt trùng), bàn đóng gói.Thiết bị trong phòng chuẩn bị dung dịch: cân xoắn và cân điện tử (cân thuốc), máy đo PH (đo giá trị PH của dung dịch nuôi cấy), máy khuấy từ (cấu hình phòng dung dịch để khuấy dung dịch).

2. Trang thiết bị phòng văn hóa

Bình nitơ lỏng, tủ bảo quản (lưu trữ đồ lặt vặt), đèn huỳnh quang và đèn cực tím, hệ thống lọc không khí, tủ lạnh nhiệt độ thấp (- 80oC), máy điều hòa, bình chứa carbon dioxide, bàn phụ (viết biên bản kiểm tra).

3. Các thiết bị phải đặt trong phòng vô trùng

Máy ly tâm (thu thập tế bào), bàn làm việc siêu sạch, kính hiển vi đảo ngược, tủ ấm CO2 (nuôi cấy), bồn nước, máy khử trùng và khử trùng ba oxy, tủ lạnh 4oC (đặt huyết thanh và dung dịch nuôi cấy).

 

2, Hoạt động vô trùng

(1) Khử trùng phòng vô trùng

1. Thường xuyên vệ sinh phòng vô trùng: mỗi tuần một lần, đầu tiên dùng nước máy để lau sàn, lau bàn, lau bàn làm việc, sau đó dùng 3 ‰ lysol hoặc bromogeramine hoặc axit peracetic 0,5% để lau.

2. Khử trùng tủ ấm CO2 (lồng ấp): đầu tiên lau bằng bromogeramine 3‰, sau đó lau bằng cồn 75% hoặc axit peracetic 0,5%, sau đó chiếu bằng đèn cực tím.

3. Khử trùng trước khi thí nghiệm: bật đèn cực tím, máy tiệt trùng 3 oxy và hệ thống lọc không khí lần lượt trong 20-30 phút.

4. Khử trùng sau thí nghiệm: lau bàn siêu sạch, bàn phụ và bệ soi kính hiển vi đảo ngược bằng cồn 75% (3‰ bromogeramine).

 

 

Chuẩn bị khử trùng của nhân viên phòng thí nghiệm

1. Rửa tay bằng xà phòng.

2. Mặc quần áo cách ly, mũ cách ly, khẩu trang và mang dép.

3. Lau tay bằng bông gòn chứa cồn 75%.

 

Trình diễn thao tác vô trùng

 

1. Tất cả các chai cồn, PBS, môi trường nuôi cấy và trypsin mang vào bàn làm việc siêu sạch phải được lau bằng cồn 75% trên bề mặt ngoài của chai.

2. Hoạt động gần ngọn lửa của đèn cồn.

3. Dụng cụ phải được khử trùng trước khi sử dụng.

4. Các dụng cụ (chẳng hạn như nắp chai và ống nhỏ giọt) tiếp tục được sử dụng phải được đặt ở nơi cao và vẫn phải ở nhiệt độ quá nóng trong quá trình sử dụng.

5. Mọi thao tác phải ở gần đèn cồn, thao tác phải nhẹ nhàng, chính xác, không được chạm ngẫu nhiên.Nếu ống hút không thể chạm vào thùng đựng chất thải.

6. Khi hút nhiều hơn hai loại chất lỏng, chú ý thay thế ống hút để tránh lây nhiễm chéo.

Xem chương tiếp theo để khử trùng dụng cụ.

 


Thời gian đăng: Feb-01-2023