Vệ sinh và khử trùng dụng cụ trong quá trình nuôi cấy tế bào

Vệ sinh và khử trùng dụng cụ trong quá trình nuôi cấy tế bào

1. Rửa đồ thủy tinh

Khử trùng đồ thủy tinh mới

1. Chải bằng nước máy để loại bỏ bụi.

2. Sấy khô và ngâm trong axit clohydric: sấy khô trong tủ sấy, sau đó ngâm trong axit clohydric loãng 5% trong 12 giờ để loại bỏ bụi bẩn, chì, asen và các chất khác.

3. Đánh răng và sấy khô: rửa bằng nước máy ngay sau 12 giờ, sau đó chà bằng chất tẩy rửa, rửa bằng nước máy rồi sấy khô trong lò.

4. Tẩy và làm sạch: ngâm trong dung dịch tẩy rửa (120g kali dicromat: 200ml axit sunfuric đậm đặc: 1000ml nước cất) trong 12 giờ, sau đó lấy dụng cụ ra khỏi bể axit và rửa bằng nước máy 15 lần, và cuối cùng rửa sạch bằng nước cất 3-5 lần và nước cất 2 lần 3 lần.

5. Sấy khô và đóng gói: Sau khi làm sạch, lau khô trước rồi mới đóng gói bằng giấy kraft (giấy bóng).

6. Khử trùng bằng áp suất cao: cho các dụng cụ đã đóng gói vào nồi áp suất và đậy nắp lại.Mở công tắc và van an toàn.Khi hơi nước bốc lên theo đường thẳng thì đóng van an toàn lại.Khi con trỏ trỏ đến mức 15 pound, hãy duy trì nó trong 20-30 phút.

7. Sấy khô sau khi khử trùng bằng áp suất cao

Khử trùng đồ thủy tinh cũ

1. Đánh bóng và sấy khô: đồ thủy tinh đã qua sử dụng có thể ngâm trực tiếp vào dung dịch lysol hoặc dung dịch tẩy rửa.Dụng cụ thủy tinh ngâm trong dung dịch lysol (chất tẩy rửa) phải được làm sạch bằng nước sạch rồi sấy khô.

2. Tẩy và làm sạch: ngâm trong dung dịch tẩy rửa (dung dịch axit) sau khi sấy khô, lấy dụng cụ ra khỏi bể axit sau 12 giờ và rửa ngay bằng nước máy (để tránh protein dính vào kính sau khi sấy), và sau đó rửa sạch bằng nước cất 3 lần.

3. Sấy khô và đóng gói: Sau khi sấy khô, lấy dụng cụ đã được làm sạch ra và sử dụng giấy kraft (giấy bóng) và các loại bao bì khác để thuận tiện cho việc khử trùng, bảo quản và ngăn ngừa bụi bẩn, tái ô nhiễm.

4. Khử trùng bằng áp suất cao: cho các dụng cụ đã đóng gói vào nồi áp suất cao, đóng nắp, mở công tắc và van an toàn, van an toàn sẽ tỏa ra hơi nước khi nhiệt độ tăng.Khi hơi nước bốc lên theo đường thẳng trong 3-5 phút, đóng van an toàn và chỉ số phong vũ biểu sẽ tăng lên.Khi con trỏ chỉ đến 15 pound, hãy điều chỉnh công tắc điện trong 20-30 phút.(Nhẹ nhàng đậy nắp cao su trước khi khử trùng chai nuôi cấy thủy tinh)

5. Sấy khô ở chế độ chờ: Do các dụng cụ sẽ bị ướt bằng hơi nước sau khi khử trùng bằng áp suất cao nên nên đưa vào lò sấy để sấy ở chế độ chờ.

Làm sạch dụng cụ kim loại

Đồ dùng bằng kim loại không thể ngâm trong axit.Khi giặt, có thể rửa bằng chất tẩy rửa trước, sau đó rửa bằng nước máy, sau đó lau bằng cồn 75%, sau đó rửa bằng nước máy, sau đó sấy khô bằng nước cất hoặc sấy khô trong không khí.Đặt nó vào hộp nhôm, đóng gói trong nồi áp suất cao, khử trùng bằng áp suất cao 15 pound (30 phút), sau đó sấy khô để chờ.

Cao su và nhựa

Phương pháp xử lý thông thường đối với cao su và các sản phẩm là rửa bằng chất tẩy rửa, rửa lần lượt bằng nước máy và nước cất, sau đó sấy khô trong lò, sau đó thực hiện các quy trình xử lý sau tùy theo chất lượng khác nhau:

1. Nắp lọc kim không thể ngâm trong dung dịch axit.Ngâm trong NaOH từ 6-12 giờ hoặc đun sôi trong 20 phút.Trước khi đóng gói, lắp hai miếng màng lọc.Chú ý đến mặt nhẵn (lõm lên) khi lắp màng lọc.Sau đó tháo nhẹ con vít ra, cho vào hộp nhôm, khử trùng trong nồi áp suất cao trong 15 pound và 30 phút, sau đó sấy khô để chờ.Lưu ý nên siết chặt vít ngay khi lấy ra khỏi bàn siêu sạch.

2. Sau khi làm khô nút cao su, đun sôi với dung dịch natri hydroxit 2% trong 30 phút (nút cao su đã sử dụng phải được xử lý bằng nước sôi trong 30 phút), rửa sạch bằng nước máy và lau khô.Sau đó ngâm trong dung dịch axit clohydric trong 30 phút, sau đó rửa bằng nước máy, nước cất và nước ba hơi rồi sấy khô.Cuối cùng cho vào hộp nhôm để khử trùng bằng áp suất cao và sấy khô để chờ.

3. Sau khi sấy khô, nắp cao su và nắp ống ly tâm chỉ được ngâm trong dung dịch natri hydroxit 2% trong 6-12 giờ (nhớ không để quá lâu), rửa sạch và sấy khô bằng nước máy.Sau đó ngâm trong dung dịch axit clohydric trong 30 phút, sau đó rửa bằng nước máy, nước cất và nước ba hơi rồi sấy khô.Cuối cùng cho vào hộp nhôm để khử trùng bằng áp suất cao và sấy khô để chờ.

4. Đầu cao su có thể được ngâm trong cồn 75% trong 5 phút, sau đó sử dụng sau khi chiếu tia cực tím.

5. Chai nhựa nuôi cấy, đĩa nuôi cấy, ống bảo quản đông lạnh.

6. Các phương pháp khử trùng khác: một số vật dụng không thể khử trùng khô cũng như không thể khử trùng bằng hơi nước mà có thể khử trùng bằng cách ngâm trong cồn 70%.Mở nắp đĩa nuôi cấy bằng nhựa, đặt lên mặt bàn siêu sạch rồi phơi trực tiếp dưới tia cực tím để khử trùng.Ethylene oxit cũng có thể được sử dụng để khử trùng các sản phẩm nhựa.Phải mất 2-3 tuần để rửa sạch ethylene oxit còn sót lại sau khi khử trùng.Hiệu quả tốt nhất là khử trùng các sản phẩm nhựa bằng tia r 20000-100000rad.Để tránh nhầm lẫn giữa thiết bị làm sạch đã được khử trùng và chưa được khử trùng, có thể đánh dấu trên bao bì giấy bằng mực in cận cảnh.Phương pháp là sử dụng bút nước hoặc bút viết để nhúng mực steganographic và đánh dấu trên giấy bao bì.Thông thường mực không có dấu vết.Khi nhiệt độ cao, chữ viết tay sẽ xuất hiện để có thể xác định xem chúng đã được khử trùng hay chưa.Chuẩn bị mực steganographic: 88ml nước cất, 2g kim cương clo hóa (CoC126H2O), 10ml axit clohydric 30%.