Ống ly tâm là một ống đơn giản có thể chịu được tốc độ và áp suất quay cao, chẳng hạn như tách một số mẫu và tách cặn phía trên.Ống ly tâm siêu lọc có hai phần tương tự như ống trong và ống ngoài.Ống bên trong là một màng có trọng lượng phân tử nhất định.Trong quá trình ly tâm tốc độ cao, những chất có trọng lượng phân tử nhỏ hơn sẽ rò rỉ vào ống dưới (tức là ống ngoài), còn những chất có trọng lượng phân tử lớn hơn sẽ bị giữ lại ở ống trên (tức là ống trong).Đây là nguyên lý siêu lọc và thường được sử dụng để cô đặc mẫu.
Ống ly tâm siêu lọc thường có thể được sử dụng mà không cần tiền xử lý, nhưng đối với xử lý mẫu protein, đặc biệt đối với dung dịch protein loãng (< 10ug/ml), tốc độ thu hồi nồng độ bằng màng siêu lọc thường không định lượng được.Mặc dù vật liệu PES giảm thiểu sự hấp phụ không đặc hiệu nhưng một số protein, đặc biệt khi chúng ở trạng thái loãng, có thể gặp vấn đề.Mức độ liên kết không đặc hiệu thay đổi tùy theo cấu trúc của từng protein.Các protein chứa các miền tích điện hoặc kỵ nước có nhiều khả năng liên kết không thể đảo ngược với các bề mặt khác nhau.Tiền xử lý thụ động trên bề mặt ống ly tâm siêu lọc có thể làm giảm sự mất hấp phụ protein trên bề mặt màng.Trong hầu hết các trường hợp, tiền xử lý cột trước khi cô đặc dung dịch protein loãng có thể cải thiện tốc độ thu hồi vì dung dịch có thể lấp đầy các vị trí hấp phụ protein trống lộ ra trên màng và bề mặt.Phương pháp thụ động hóa là ngâm trước cột với thể tích dung dịch thụ động cao hơn trong hơn 1 giờ, rửa kỹ cột bằng nước cất, sau đó ly tâm một lần bằng nước cất để loại bỏ hoàn toàn dung dịch thụ động còn sót lại trên màng. .Cẩn thận không để màng khô sau khi thụ động.Nếu muốn sử dụng sau này, bạn cần thêm nước cất vô trùng để giữ ẩm cho màng.
Ống ly tâm siêu lọc thường không thể khử trùng và tái sử dụng.Vì giá thành của một ống đơn không hề rẻ nên nhiều người cố gắng tái sử dụng - kinh nghiệm là rửa sạch bề mặt màng bằng nước cất nhiều lần rồi ly tâm một hoặc hai lần.Ống nhỏ có thể ly tâm ngược có thể ngâm vào nước cất rồi ly tâm ngược nhiều lần sẽ tốt hơn.Nó có thể được sử dụng nhiều lần cho cùng một mẫu và có thể được ngâm trong nước cất khi không sử dụng nhưng sẽ ngăn ngừa được sự nhiễm khuẩn.Không trộn lẫn các mẫu khác nhau.Một số người cho rằng ngâm trong cồn 20% và NaOH 1n (natri hydroxit) có thể ngăn chặn sự phát triển của vi khuẩn và chống khô.Chỉ cần màng siêu lọc xâm nhập vào nước thì không thể để khô được.Tuy nhiên, những người khác lại cho rằng nó sẽ phá hủy cấu trúc màng.Trong mọi trường hợp, các nhà sản xuất thường không hỗ trợ việc tái sử dụng.Việc sử dụng nhiều lần sẽ chặn kích thước lỗ rỗng của màng lọc, thậm chí gây rò rỉ chất lỏng, ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm.
Thời gian đăng: Sep-05-2022